一、技术背景：

骨成型蛋白(BMP)ELISA试剂盒上海极威生物科技有限公司是一家具有高科技专业研发能力的新晋企业，产品覆盖广泛，拥有优质的产品与专业的技术团队，凭借极威生物品牌的技术和服务基础，快速便捷的供货体系，实惠经济的解决方案，受到全球实验室的好评，成为迅速崛起的佼佼者！

10月14日下午2点30分，据极威生物报道骨成型蛋白(BMP)ELISA试剂盒优惠消息，Elisa试剂盒半价试用，买三送一，买五送二，更多优惠咨询客服。

二：产品介绍：

指标名称：骨成型蛋白(BMP)ELISA试剂盒   

规格：48T×1/盒、96T×1/盒

品牌：极威生物

运输方式：快递运输

保存温度：2-8℃

货期：现货直达

检测波长：450nm

所需样本体积：保险量50ul

适用范围：仅供科研课题研究，不得用于临床诊断。

检测样本种类：血清，血浆，尿液，组织匀浆，细胞上清液，脑脊液，灌洗液，粪便等样本

极威供应属种有：大鼠、小鼠、子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物、鱼、昆虫ELISA试剂盒等

样本处理方法：

1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

三、骨成型蛋白(BMP)ELISA试剂盒原理

本试剂盒系由预包被的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（ELISA）原理检测血清、血浆样本中抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本，经温育后若样品中含有指标抗体，则将与酶标板上抗原结合，经洗涤除去未结合的其他成分后；再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有抗体。

四、骨成型蛋白(BMP)ELISA试剂盒试剂盒组成

序号 名称 规格（48T×1） 规格（96T×1）

1. 酶标板   48T×1  96T×1

2. 酶标记物    5.5ml×1   11ml×1

3. 抗体工作液    5.5ml×1   11ml×1

4. 20X浓缩洗涤液 20ml×1  40ml×1

5. 底物液A      3ml×1     6ml×1

6. 底物液B     3ml×1     6ml×1

7. 终止液     3ml×1   66ml×1

8. 阳性对照   0.5 ml×1 1.0 ml×1

9. 阴性对照   0.5 ml×1 1.0 ml×1

10. 盖板膜 1张 1张

11. 自封袋 1个 1个

12. 说明书 1份 1份

五、骨成型蛋白(BMP)ELISA试剂盒样品准备

1.取动物全血按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品1周内可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。

2.用样品稀释液将待检血清按40倍稀释（如5μl血清加入195μl样品稀释液中，混匀）。阴、阳性对照不用稀释。

3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。

注意：ELISA属固相免疫测定，抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例，加入板孔中的标本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会，只有最贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程，因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。

六、骨成型蛋白(BMP)ELISA试剂盒检验方法

1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。

2.取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。

3.空白对照孔加样品稀释液100μl；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。

4.混匀，置37℃反应30分钟。

5.扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。

6.每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。

7.洗涤，同步骤5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。

9.每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值）。

七、骨成型蛋白(BMP)ELISA试剂盒问题解答

ELISA试剂盒客户：ELISA试验方法的局限性是指什么？

极威生物解答：该试验仅作为定性检测血清、血浆中抗体，根据A值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。

ELISA试剂盒客户：ELISA试剂盒的储存及有效期是多少？

极威生物解答：于2～8℃避光保存，有效期为6个月。

包被板开封后请于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限为2个月。

ELISA试剂盒客户：ELISA检测试剂盒适用仪器有哪些？

极威生物解答： 含450nm、630nm波长的酶标仪，37℃恒温设备，可调微量移液器。

ELISA试剂盒客户：如果是尿液样本要怎么收集呢？

极威生物解答：尿液：用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

ELISA试剂盒客户：ELISA样本是细胞培养上清的话要怎么收集？

极威生物解答：细胞培养上清：A、检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。B、检测细胞内的成份时，用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

ELISA试剂盒客户：ELISA组织标本要怎么采集和保存呢？

极威生物解答：组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

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